qPCR与数字PCR结果判读

更新：2026-10-13；状态：可用；验证范围：官方平台资料与原始研究核对；原理及判读，未执行湿实验或平台测序。

qPCR看扩增曲线和阈值，数字PCR看有效分区与统计校正，均需保留质量和独立单位。

qPCR看什么

看扩增曲线、阈值/基线、特异性、对照、有效反应和效率。较小Cq/Ct通常与更多可扩增目标相关，跨目标或条件比较仍需效率、输入与参考策略相容。

ΔCt/ΔΔCt和简化倍数关系在转录组差异与qPCR验证设计维护。技术重复先汇总到生物学单位，不将每个孔当新样本。

数字PCR统计思想

理想随机独立分区模型下，阳性比例p对应平均每分区目标数 $\lambda=-\ln(1-p)$。阳性分区不等于单分子，浓度换算还需有效体积、稀释和分析体积定义。

p接近1时推断不稳定，全部阳性时不能报告有限精确浓度。分区体积、抑制、阈值、无效分区和中间信号影响结果，不能只保留软件最终数。

怎样报告

记录目标、独立/技术重复、原始曲线或分区、软件和阈值、对照、未检出/失败、效应和区间。未检出不证明不存在，“绝对”不表示无误差。

本页未执行反应或真实数据分析。规范：MIQE 2.0、dMIQE 2020。