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RT-PCR实时PCR与数字PCR的区别
更新:2026-10-13;状态:可用;验证范围:官方平台资料与原始研究核对;原理及判读,未执行湿实验或平台测序。
逆转录、实时检测和数字分区描述不同环节,RT不能默认解释为实时。
先把名称拆开
| 名称 | 主要含义 | 常见输出 |
|---|---|---|
| 常规PCR | 扩增DNA,常在终点观察产物 | 产物及检测结果 |
| RT-PCR | 先逆转录RNA为cDNA,再PCR | RNA来源目标的扩增结果 |
| qPCR / real-time PCR | 随循环监测荧光相关信号 | 扩增曲线、Cq/Ct等 |
| RT-qPCR | 逆转录与实时定量结合 | RNA目标的相应定量 |
| dPCR | 分区后依据终点阳性/阴性推断含量 | 分区计数与浓度估计 |
| ddPCR | 液滴分区的一类dPCR | 液滴分类与相应估计 |
RT通常指reverse transcription,不是“实时”的通用缩写。数字PCR也可接入逆转录,液滴只是分区形式之一。
定量假设
Cq/Ct来自阈值及算法,受效率、背景与输入影响。dPCR不是简单把阳性分区数当分子数:一个分区可能含多个目标,需要统计校正和体积定义。
“绝对定量”不表示没有测量误差。回收、抑制、分区分类、有效体积和参考材料均影响结果。
判读见qPCR与数字PCR结果判读;转录组用途见转录组差异与qPCR验证设计。依据:MIQE 2.0、dMIQE 2020。