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N50组装连续性与完整性

更新:2026-10-13;状态:可用;验证范围:官方平台资料与原始研究核对;原理及判读,未执行湿实验或平台测序。

N50描述长度加权连续性,不能单独证明组装正确、完整或无污染。

N50如何计算

长度从大到小累计到总长一半时,对应长度为N50。它不是按序列条数的中位数;read N50与contig N50的对象不同。

500、100、100、100、100、100总长1000,N50=500,中位长度100。NG50用指定参考基因组长度的一半作阈值;总组装不足时可没有NG50值。

连续、完整与正确

contig通常是连续组装序列;scaffold可包含连接与间隙,具体格式需核对。大contig可能错拼,高N50也可能伴随重复折叠或污染。

BUSCO按所选谱系保守基因评估相应完整性,不覆盖全部非编码结构;重复BUSCO可能来自倍性、未分开的单倍型或错误。QUAST在适当参考下还能检查结构,参考差异也需考虑。

一起报告

报告总长、序列数、N50/NG50对象与分母、缺口、基因集、污染、覆盖及单倍型一致性,不只挑最大N50判断算法。

工具:QUAST、BUSCO。应用见混合测序组装与结果评估。