单端双端读长与插入片段 - SpiralKernel/bioinfo-wiki GitHub Wiki

单端双端读长与插入片段

更新:2026-10-13;状态:可用;验证范围:官方平台资料与原始研究核对;原理及判读,未执行湿实验或平台测序。

双端是读同一片段两端,片段长度决定重叠和间隔,PE150不等于连续300碱基。

四个数量

read length是单条读段长度;paired-end在同一文库分子两端读出R1/R2;插入片段长度描述目标分子范围;整条文库长度还可能含接头。不同报告对insert或fragment的定义需核对。

PE150通常指两端各读150碱基。短插入片段可产生重叠,长片段中间可能未直接读到;简单连接两端会制造未测得的连续序列。

对指标和分析的影响

双端提供方向、间距和比对约束,一对read却不是两个独立原始分子。重叠区域按两条read分别计深度,与按分子合并重叠的口径不同。

片段短于读段时可能读到接头;剪切需结合结构。mate-pair与普通paired-end的制备和方向也不应混称。

算例

40个独立片段,各120 bp、两端各75 bp,重叠30 bp。直接累加测序碱基6000 bp,按原始分子合并重叠只覆盖4800 bp。这里只因两端覆盖整段,合并覆盖才恰好等于片段跨度;有中间空隙时不成立。

更多见人工区间贯通测序指标。定义依据:Illumina单双端。